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Quad 7500 LC-MS/MS三重四級(jí)桿液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)應(yīng)用技術(shù)
1 生物基質(zhì)中多肽/蛋白質(zhì)制劑的定量分析對(duì)于新藥研發(fā)來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。作為與傳統(tǒng)的配體結(jié)合試驗(yàn)并行的分析技術(shù)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成為生物分析實(shí)驗(yàn)室中蛋白質(zhì)定量檢測(cè)的日常手段。與現(xiàn)今的LBAs技術(shù)相比，三重四極桿系統(tǒng)在檢測(cè)小體積樣品中的低濃度分析物方面的能力使其成為主要的分析手段。
結(jié)論：基于SCIEX Triple Quad 7500 LC-MS/MS系統(tǒng)-QTRAP Ready開(kāi)發(fā)了高靈敏度的肽段定量檢測(cè)流程。通過(guò)具有E Lens技術(shù)的OptiFlow Pro離子源和D Jet離子導(dǎo)向的整
合，在生物基質(zhì)中特征肽段定量檢測(cè)時(shí)與以往產(chǎn)品相比，靈敏度平均提高了3倍。
2 大鼠血漿中完整賴脯胰島素超靈敏的定量方法
胰島素類似物是通過(guò)在天然胰島素結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)行改造，形成等效或增效血糖控制的胰島素替代物。它們中的膳食胰島素類似物，如賴脯胰島素、阿斯巴甜胰島素、格列嗪胰島素，與人胰島素相比更容易吸收、起效更迅速，因此研究此類胰島素類似物的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)屬性至關(guān)重要。
結(jié)論
• 建立了基于SCIEX Triple Quad™ 7500 LC-MSMS系統(tǒng) - QTRAP® Ready檢測(cè)大鼠血漿中賴脯人胰島素MRM定量方法，該方法靈敏度高。
• 賴脯人胰島素在大鼠血漿中的定量下限為0.1 ng/mL，該方法分析重現(xiàn)性、準(zhǔn)確度、定量線性良好。
• SCIEX 7500系統(tǒng)有超高的靈敏度，得益于其配有E Lens技術(shù)加持的OptiFlow Pro離子源和D Jet離子導(dǎo)向技術(shù)。
3 高通量靶向脂質(zhì)組學(xué)方法實(shí)現(xiàn)廣泛的脂質(zhì)定量
脂質(zhì)組學(xué)中直接進(jìn)樣的鳥(niǎo)槍法是一種廣泛使用的脂質(zhì)組學(xué)分析方法。該方法快速簡(jiǎn)單，但是會(huì)受到明顯的離子抑制效應(yīng)，同時(shí)，由于脂質(zhì)分子眾多并伴有大量同分異構(gòu)體的峰重疊，從而使得精確辨認(rèn)每一種脂質(zhì)十分困難。正相和反相液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用也被廣泛應(yīng)用于脂質(zhì)組學(xué)研究。液質(zhì)聯(lián)用方法可以根據(jù)脂類物質(zhì)理化性質(zhì)的不同對(duì)其進(jìn)行分離，但是建立一個(gè)能夠同時(shí)檢測(cè)盡可能多的不同類別的脂質(zhì)分子的定量方法仍然極具挑戰(zhàn)。
結(jié)論：提出了一種靶向的脂質(zhì)組學(xué)分析策略，該策略能夠在脂質(zhì)分子水平上對(duì)多種不同的脂質(zhì)進(jìn)行定量(~1900個(gè)分子種類)。該方法可以對(duì)不同脂類進(jìn)行色譜分離，減少同分異構(gòu)體的干擾，更加快速和特異的進(jìn)行脂質(zhì)篩選。靶向脂質(zhì)列表十分全面，涵蓋了大部分脂類。所選取的MRMs離子對(duì)覆蓋12-26個(gè)碳、0-6個(gè)雙鍵的脂肪酸、包括奇數(shù)側(cè)鏈的脂類物質(zhì)。該MRM列表是個(gè)性化定制的，可以添加新的脂類、亞類和多種脂質(zhì)分子。利用血漿基質(zhì)結(jié)合LC-MRM分析進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，方法靈活度高，得到的結(jié)果可靠穩(wěn)定。開(kāi)發(fā)的簡(jiǎn)單工具(sMRM Pro Builder模板)可以將靶向MRM方法的優(yōu)化過(guò)程流程化，從而在進(jìn)行大量Scheduled MRM離子對(duì)掃描時(shí)得到高質(zhì)量的結(jié)果。
4 人全血中法醫(yī)類化合物的高靈敏度檢測(cè)
保持可靠定量的同時(shí)，也可實(shí)現(xiàn)低水平檢測(cè)是任何穩(wěn)定生物分析工作流程的關(guān)鍵性能指標(biāo)。在法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，超寬濃度范圍下，對(duì)復(fù)雜生物基質(zhì)樣本中的大量分析物同時(shí)進(jìn)行精準(zhǔn)定量的能力是非常有挑戰(zhàn)性的，通常需要稀釋樣品，以使其處于儀器的線性范圍內(nèi)。為了進(jìn)一步減少樣品制備和再分析時(shí)間，要求采集到足夠多的化合物色譜峰，并且獲得寬線性動(dòng)態(tài)范圍，以確保全面的分析物覆蓋率和可靠的定量性能
結(jié)論：使用SCIEX Triple Quad 7500系統(tǒng)檢測(cè)人全血中49種毒物的優(yōu)化且靈敏的方法。SCIEX OS軟件中的Scheduled MRM Algorithm Pro功能實(shí)現(xiàn)了數(shù)據(jù)采樣方法的優(yōu)化。新硬件OptiFlow Pro離子源、D Jet離子導(dǎo)向技術(shù)和E Lens技術(shù)提供了對(duì)所有目標(biāo)毒物亞- ng/mL級(jí)別靈敏度，有些甚至可以降至pg/mL級(jí)別，同時(shí)保持測(cè)量的線性、精確度和準(zhǔn)確性。這種超乎尋常的靈敏度的獲得，是在沒(méi)有任何數(shù)據(jù)質(zhì)量的犧牲或妥協(xié)的情況下實(shí)現(xiàn)的，正如在LLOQ下，觀察到的極佳的精確度和準(zhǔn)確性所證明的那樣?？傮w而言，SCIEX Triple Quad 7500系統(tǒng)的所有功能結(jié)合在一起，使得本研究中所檢測(cè)的一系列毒物的靈敏度得到了大幅提高。
5 提高靶向宿主細(xì)胞蛋白肽段定量分析靈敏度的策略
宿主細(xì)胞蛋白（Host cell proteins, HCPs）是與重組生物藥制劑生產(chǎn)過(guò)程相伴產(chǎn)生的主要雜質(zhì)種類。其含量與制劑的安全性和有效性密切相關(guān)，因此從制劑開(kāi)發(fā)到質(zhì)量控制整個(gè)過(guò)程都非常需要對(duì)HCPs進(jìn)行定量測(cè)定。在下游生產(chǎn)和質(zhì)量控制階段，需要靶向定量的HCPs通常是預(yù)先制定好的，它們?cè)谧罱K制劑或之后純化步驟中痕量存在。這使得對(duì)于建立更高靈敏度、更快速分析、更皮實(shí)耐用、更具復(fù)合分析能力（一針進(jìn)樣定量更多的分析物）的靶向HCP分析方法的需求更加強(qiáng)烈。三重四極桿和QTRAP液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)由于其優(yōu)異的定量分析能力，是開(kāi)展這項(xiàng)工作的理想平臺(tái)。
結(jié)論：靶向HCP定量分析流程的建立體現(xiàn)了SCIEX 7500系統(tǒng)的高靈敏度、高分析通量、高耐用性以及高復(fù)合分析能力信噪比平均提高4倍具有極其優(yōu)異的靈敏度，其中2/3的目標(biāo)蛋白為0.02-1 ppm。其余的為1-4.54 ppm在高確信度(每個(gè)蛋白4個(gè)檢測(cè)通道)的情況下，所有48個(gè)蛋白質(zhì)的定量用8min的液質(zhì)聯(lián)用分析方法完成
6 促尿鈉排泄肽類家族環(huán)肽類化合物L(fēng)C-MRM定量靈敏度的提高環(huán)肽類化合物如今已成為重要藥物。這與其在血液中的穩(wěn)定性以及口服給藥劑量相關(guān)。采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)開(kāi)發(fā)對(duì)生物樣本中環(huán)肽類化合物的痕量定量檢測(cè)仍具有非常大的挑戰(zhàn)，生物樣本基質(zhì)中的高背景干擾要求液質(zhì)方法有很好的選擇性，都能獲得期望的靈敏度。由于環(huán)肽類化合物的三級(jí)折疊結(jié)構(gòu)以及其結(jié)構(gòu)中缺乏活潑的質(zhì)子，也會(huì)經(jīng)常防礙產(chǎn)生碎片離子。
結(jié)論：在SCIEX Triple Quad™7500 LC-MSMS系統(tǒng)- QTRAP® Ready上建立了環(huán)肽類化合物定量的方法，該方法靈敏度高。人ANP和BNP在大鼠血漿中的定量下限為0.05ng/mL，分析方法重現(xiàn)性、準(zhǔn)確度、定量線性良好。在配有E Lens技術(shù)的OptiFlow Pro離子源和D Jet離子導(dǎo)向技術(shù)的加持下，本文的方法與之前報(bào)道方法相比，靈敏度有顯著提高
7 直接檢測(cè)飲用水和瓶裝水中農(nóng)殘和PPCPs的LC-MS/MS方法
飲用水分析的限量值（prescribed consent values, PCV）極低且嚴(yán)格。水供應(yīng)商和公用事業(yè)公司需要確保他們送去裝瓶或進(jìn)入供水網(wǎng)絡(luò)的最終水產(chǎn)品是安全的，并且符合國(guó)家的法規(guī)要求。1,2,3水可能是一個(gè)具有挑戰(zhàn)性的基質(zhì)，尤其是在進(jìn)入水處理過(guò)程之前的來(lái)自河流、湖泊或水庫(kù)的水。因此，為自來(lái)水公司提供服務(wù)的實(shí)驗(yàn)室必須有高靈敏度的儀器，來(lái)精確的定量超出PCV限值的數(shù)據(jù)和面對(duì)各種基質(zhì)的挑戰(zhàn)。
結(jié)論：通過(guò)水中431種化合物的定量分析，證明了SCIEX TripleQuad 7500 LC-MS/MS系統(tǒng)- QTRAP Ready靈敏度高，在低濃度化合物(ng/L級(jí)別的痕量測(cè)定)的測(cè)定分析領(lǐng)域具有很大潛力;樣品直接進(jìn)樣分析，無(wú)需復(fù)雜前處理過(guò)程，提高了工作效率;采用直接進(jìn)樣的方式即可使水研究實(shí)驗(yàn)室超越現(xiàn)在的靈敏度極限;SCIEXOS軟件操作簡(jiǎn)單靈活。采用本文的工作流程可大大縮短從采樣到出報(bào)告的時(shí)間，這將對(duì)水環(huán)境的監(jiān)測(cè)和質(zhì)量把控工作提供積極的影響。
可以根據(jù)客戶的實(shí)際需求進(jìn)行化合物的擴(kuò)充，也可以應(yīng)用到其他低濃度痕量物質(zhì)的測(cè)定工作流程中。創(chuàng)新的SCIEX 7500系統(tǒng)可以有效降低基質(zhì)效應(yīng)，提高靈敏度，這必將引領(lǐng)水行業(yè)進(jìn)入一個(gè)新的分析時(shí)代。
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