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液相色譜儀HPLC(一)紫外可見吸收檢測器
發(fā)表時間:2022/3/11 10:46:52  |  點擊率:8765

上篇我們有講到高效液相色譜儀HPLC檢測器的類型,其中紫外可見吸收檢測器是液相色譜儀HPLC中應用最廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對強吸收物質檢測限可達1ng,檢測后不破壞樣品,可用于制備,并能與任何檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作原理與結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。

紫外吸收檢測器UV檢測器是液相色譜儀HPLC中最常用的檢測器,它占液相色譜儀HPLC檢測器使用率的75%,生產(chǎn)液相色譜的廠家基本都會配帶這種檢測器。

紫外吸收檢測器UV檢測器特點

● 靈敏度高,最小檢測量可達10-9g/mL,也可以檢測對于紫外吸收弱的組分;

● 線性范圍寬,大多數(shù)UV檢測器可以在1.5-2.0AU下保持良好的線性;

● 不易受溫度、流速等因素的影響

● 可用于梯度洗脫

● 可與不同檢測器串聯(lián)使用,如雙光路雙流路紫外/熒光檢測器(UV/FLD-1)

紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長,并安裝一個光柵型單色器,其波長選擇范圍寬(190nm~800nm)。它有兩個流通池,一個作參比,一個作測量用,光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上,若兩流通池都通過純的均勻溶劑,則它們在紫外波長下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強度相等,無信號輸出。當組分進入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與組分濃度有關。

局限:流動相的選擇受到一定限制,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相,每種溶劑都有截止波長,當小于該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。

總結紫外吸收檢測器的優(yōu)點、缺點
基于試樣組分對特定波長紫外可見光的選擇性吸收,組分濃度與吸光度成正比

1. 優(yōu)點
① 靈敏度高,其最小檢測量10-9g/mL;
② 線性范圍寬;
③ 可用于梯度洗脫;
④ 波長可選,易于操作;
⑤ 可與任何檢測器串聯(lián)使用

2. 缺點
① 對紫外光完全不吸收的試樣不能檢測;
② 溶劑的選擇受限制

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