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二手多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用是通過對(duì)一級(jí)或上級(jí)質(zhì)譜產(chǎn)生離子的進(jìn)一步裂解產(chǎn)生次級(jí)質(zhì)譜，并對(duì)次級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行質(zhì)量分析的技術(shù)。依據(jù)實(shí)現(xiàn)方式，多級(jí)質(zhì)譜可分為兩類：一類是時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜，它是利用某些質(zhì)量分析器能夠儲(chǔ)存離子的特性，在同一個(gè)質(zhì)量分析器上，通過時(shí)間序貫實(shí)現(xiàn)多級(jí)質(zhì)譜分析；另一類是空間串聯(lián)質(zhì)譜，它是利用多個(gè)質(zhì)量分析器在空間上串聯(lián)從而實(shí)現(xiàn)多級(jí)質(zhì)譜的功能。

二手多級(jí)質(zhì)譜聯(lián)用之時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜法
時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜主要是由離子阱或FT一ICR完成操作。從“硬件”方面來看，只需要一個(gè)質(zhì)量分析器，因而儀器費(fèi)用較空間串聯(lián)質(zhì)譜要低，這是時(shí)問串聯(lián)質(zhì)譜的最大優(yōu)點(diǎn)。

也正因?yàn)檫@個(gè)原因，時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜可達(dá)到多級(jí)(MSn)，這是空間串聯(lián)質(zhì)譜所不能及的。

在離子阱中完成串聯(lián)質(zhì)譜的實(shí)驗(yàn)步驟組成：
①按前述的離子阱穩(wěn)定性圖，選擇適當(dāng)?shù)膗、P值，可選出某一質(zhì)荷比的離子貯存在離子阱中，質(zhì)荷比更大或更小的其它離子均逐出離子阱。
②進(jìn)行碰撞誘導(dǎo)斷裂CID。由于離子阱在運(yùn)行時(shí)是充氦氣的，加大初始離子(pre．cursor ion)的動(dòng)能即可實(shí)現(xiàn)CID。例如，在端蓋極上加一個(gè)輔助的正弦波形的“擾動(dòng)(tickle)”電位，其頻率調(diào)諧至離子運(yùn)動(dòng)的基頻，因此離子從這個(gè)輔助的“擾動(dòng)"電場(chǎng)中吸收能量，這是一個(gè)共振激發(fā)的過程。仔細(xì)控制擾動(dòng)電位的振幅，使離子不致于從離子阱中逐出，但離子已從離子阱的中心拉出來，增加了動(dòng)能，和氦氣分子碰撞，發(fā)生CID。
③進(jìn)行質(zhì)量掃描，得到產(chǎn)物離子的質(zhì)譜，這由掃描V而完成。
以上一個(gè)循環(huán)由計(jì)算機(jī)控制完成。必要時(shí)，可進(jìn)行下一級(jí)乃至多級(jí)(Msn)實(shí)驗(yàn)。
由于離子在離子阱中不斷作回旋性的運(yùn)動(dòng)，因而有較高的碰撞效率。時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜只能完成產(chǎn)物離子掃描，不能進(jìn)行初始離子掃描和中性碎片丟失掃描，但產(chǎn)物離子掃描是最重要的一種掃描。

二手多級(jí)質(zhì)譜法

離子阱質(zhì)譜法(ITMS)和傅里葉變換離子回旋共振質(zhì)譜法(FTICRMS,即FTMS)的發(fā)展，使MSn(n>2)成為可能，這兩種方法均有離子貯存及選擇性排斥功能。MSn實(shí)驗(yàn)是通過軟件實(shí)現(xiàn)的，樣品離子化后，用脈沖程序?qū)⑦x定的m／z離子以外的其他離子排斥出去，用脈沖閥導(dǎo)入碰撞氣體，將選定的離子加速至足夠的動(dòng)能，經(jīng)CID得到產(chǎn)物離子。上述程序可重復(fù)進(jìn)行，直至實(shí)現(xiàn)MSn。

二手多級(jí)質(zhì)譜法的源內(nèi)CID(in—source CID)是利用API—MS的離子傳輸區(qū)的電場(chǎng)，在約133Pa的壓力下，碰撞誘導(dǎo)離子裂解，產(chǎn)生CID譜。

優(yōu)點(diǎn)：碰撞活化效率高，因而靈敏度高；簡(jiǎn)便，不必知道Ma+的m／z；可選擇的能量范圍較寬，以適應(yīng)于不同穩(wěn)定性的化合物；儀器簡(jiǎn)單、價(jià)廉。所以，在藥物分析中可以解決多數(shù)定性、定量問題。

缺點(diǎn)：如有雜質(zhì)及共流出峰存在將產(chǎn)生復(fù)雜的結(jié)果；由于需進(jìn)行色譜分離，因而增加了分析時(shí)間。

無論是哪種方式的串聯(lián)，都必須有碰撞活化室，從第一級(jí)MS分離出來的特定離子，經(jīng)過碰撞活化后，再經(jīng)過第二級(jí)MS進(jìn)行質(zhì)量分析，以便取得更多的信息。